注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。測定意義
FDA 水解反應能很好的反應土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機質(zhì)的轉化，是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學指標之一。

測定原理

FDA 是一種無色化合物，在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解，并經(jīng)脫水反應，產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在 490nm 處有強吸收峰，通過檢測 490nm 處的吸光值變化可計算得FDA 水解酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

標準液：液體 4mL×1 瓶，4℃保存。試劑一：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑 1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加 4mL 試劑三溶解。試劑三：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。

樣本處理

稱取風干過 30-50 目篩土壤約 0.1g，備用。

測定操作表

	空白管	標準管	對照管	測定管
樣本（g）			0.05	0.05
標準液（μL）		40
雙蒸水（μL）	40
試劑一（μL）	200	200	240	200
試劑二（μL）				40
充分混勻，30℃，震蕩 1h
試劑三（μL）	160	160	160	160
10000g，25℃，離心 5min，取 200μL 上清于微量石英比色皿/96 孔板中測定 490nm 處吸 光值A，△A1=A 標準管-A 空白管，△A2=A 測定管-A 對照管

注意：空白管和標準管只需測定一次。酶活性計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。
S-FDA 活性（μmol/d/g 土樣）=（△A2÷△A1×C 標準品）×V 反總÷W
= 0.96×（△A2÷△A1）÷W
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。
S-FDA 活性（μmol/d/g 土樣）=（△A2÷△A1×C 標準品）×V 反總÷W
= 0.96×（△A2÷△A1）÷W
C 標準品：標準品濃度 100μmol/L；V 反總：反應總體積，0.4mL；W：樣本質(zhì)量，g